Microscope de mesure PTI RatioMaster

à fluorescenceà haute vitesse

Vue d'ensemble PTI RatioMaster est un système de microscope à champ large basé sur un monochromateur pour mesurer l'intensité des colorants ratio-fluorescents ou fluorescents des protéines marquées en concentrations nanomolaires. La microscopie par rapport à la fluorescence est l'outil ultime pour étudier les événements dynamiques dans les cellules vivantes et les structures cellulaires. Contrairement à la microscopie à fluorescence conventionnelle basée sur l'intensité, le ratio-fluorescence élimine les effets du photo-blanchiment, la variation de la longueur du trajet cellulaire, la non-uniformité de la charge de colorant, le champ de vision non-uniforme, faisant du ratio-fluorescence la méthode la plus précise pour déterminer les concentrations intracellulaires en ions. Plus important encore, PTI RatioMaster est suffisamment rapide pour fournir des informations dynamiques essentielles sur les concentrations d'ions et les interactions avec d'autres molécules, médicaments ou réactifs ajoutés. Le PTI RatioMaster est capable d'effectuer des mesures de fluorescence de rapport dynamique à l'échelle de la milliseconde. Une lampe à arc au xénon fournit un éclairage à large bande continu à haute intensité. Les longueurs d'onde d'excitation alternatives sont sélectionnées par un monochromateur à accès aléatoire à haute vitesse commandé par ordinateur couplé à un microscope à fluorescence inversé ou vertical (spécifié ou fourni par l'utilisateur) avec un guide optique liquide. La lumière émise est recueillie à partir de l'échantillon et passe à travers un photomètre ayant un iris translatable bilatéral et un oculaire de visée vers un détecteur de photomultiplicateur à comptage analogique/photon commutable. La détection analogique est utilisée lorsque la lumière émise est relativement intense ; les faibles niveaux de lumière sont détectés par comptage de photons. Toutes les fonctions du système sont contrôlées par ordinateur. Les données sont collectées et analysées par un logiciel de fluorescence avancé basé sur Windows FelixGX.